Определение активности амилолитических ферментов по гидролизу субстрата, иммобилизованного в полиакриламидном геле
Доклады Башкирского университета. 2017. Том 2. № 5. С. 736-740.
Авторы
Максутова В. О.*
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
*E-mail: vilenka312@yandex.ru
Цветков В. О.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Шпирная И. А.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Ибрагимов Р. И.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Абстракт
В ходе работы была определена амилолитическая активность препаратов амилаз с использованием субстрата, иммобилизованного в полиакриламидном геле. В работе использовали препараты амилаз Bacillus subtilis, Leptinotarsa decemlineata Say и слюны человека. Также были проведены опыты по определению влияния рН раствора и концентрации соли на окрашивание геля. Изображения полученных гелей после окрашивания анализировали с помощью компьютерной программы, позволяющей определять среднее значение цвета отдельных участков на изображении.
Ключевые слова
- амилолитические ферменты
- определение активности
Литература
- Энциклопедический словарь медицинских терминов / Под ред. Петровский Б. В. М.: Советская энциклопедия, 1982-1984. 1424 с.
- Horvathova V, Janecek S, Sturdik E. Amylolytic enzymes: their specificities, origins and properties // Biologia, Bratislava, 2000. V. 55. №6. P. 605-615.
- Henrissat B. A classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities // Biochem. J, 1991. V. 280. P. 309-316.
- Калимкулова М. Получение рекомбинантной α-амилазы AMY1UA7 из Bacillussubtilis в клетках Escherichiacoli / Калимкулова М., Кирибаева А., Мухамедьяров Д., Куламетов Ж., Ахметоллаев И., Силаев Д., Хасенов Б.// Eurasian Journal of Applied Biotechnology. Астана: Респ. гос. предприятие на праве хоз-го ведения «Национальный центр биотехнологии» комитета науки мин. обр. и науки респ. Казахстан, 2015. №4. С. 57-65
- Hagihara H., Igarashi K., Hayashi Y., Endo K., Ikawa-Kitayama K., Ozaki K., Kawai S., Ito S. Novel alpha-amylase that is highly resistant to chelating reagents and chemical oxidants from the alkaliphilic Bacillus isolate KSM-K38 // Appl Environ Microbiol, 2001. V.67. №4. P. 1744-1750.
- Mozhaev V. V. Mechanism-based strategies for protein thermostabilization // Trends Biotechnol, 1993. V.11. №3. P. 88-95.
- Schallmey M., Singh A., Ward O. P. Developments in the use of Bacillus species for industrial production // Can J Microbiol, 2004. V. 50. №1. P. 1-17.
- Семенкова И. Г. Фитопатология. Древоразрушающие грибы, гнили и патологические окраски древесины (определительные таблицы): учебное пособие. М.: ГОУ ВПО МГУЛ, 2008. 72 с.
Determining of the activity of amylolytic enzymes using substrate immobilized in polyacrylamide gel
Authors
Maksutova V. O.*
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
*E-mail: vilenka312@yandex.ru
Tsvetkov V. O.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Shpirnaya I. A.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Ibragimov R. I.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Abstract
In the work, the amylolytic activity of amylase preparations was determined using a substrate immobilized in a polyacrylamide gel. The preparation used amylases of Bacillus subtilis, Leptinotarsa decemlineata Say and human saliva. Also, the experiments were conducted to determine the effect of the pH of the solution and the concentration of the salt on the gel. The images of the gels obtained after staining were analyzed using a computer program to determine the average color value of individual areas in the image.
Keywords
- amylolytic enzymes
- activity determination