Выделение и характеристика протеаз Phytophthora infestans

Доклады Башкирского университета. 2017. Том 2. № 5. С. 719-724.

Авторы


Максутова В. О.*
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Цветков В. О.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Шпирная И. А.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32
Ибрагимов Р. И.
Башкирский государственный университет
Россия, Республика Башкортостан, 450076 г. Уфа, улица Заки Валиди, 32

Абстракт


В ходе работы был получен аффинноочищенный на специфичном субстрате суммарный препарат протеаз из экстракта гомогената мицелия Phytophthora infestans с высокой степенью очистки. Показано присутствие высокой протеолитической активности во множестве фракций. Также были проведены опыты по определению температурной стабильности протеаз. Методом электрофореза в иммобилизованном субстрате исследована протеолитическая активность отдельных молекулярных форм протеаз в клетках и культуральной жидкости P. infestans .

Ключевые слова


  • Phytophthora infestans
  • аффинная хроматография
  • протеолитические ферменты

Литература


  1. Яруллина Л. Г., Ахатова А. Р., Касимова Р. И. Гидролитические ферменты и их белковые ингибиторы в регуляции взаимоотношений растений с патогенами // Физиология растений. 2016. Т.63. №2. С.205-217.
  2. Прист Ф. Внеклеточные ферменты микроорганизмов. М.: Мир, 1987. 117 с.
  3. СавальеваО. Н., Васюкова Н. И. Токсические вещества и ферменты Phytophthora infestans / Под общ.ред. Л. В. Метлицкий// Биохимический основы защиты растений. М.: Наука, 1966. 231 с.
  4. Грачева И. М., Кривова А. Ю. Технология ферментных препаратов/ М.: Высшая школа, 2003. 251 с.
  5. Валуева Т. А. Роль ингибиторов протеиназ в защите картофеля / Т. А. Валуева, Т. А. Ревина, Е. Л. Гвоздева, Н. Г. Герасимова, О. Л. Озерецковская // Биоорганическая химия. 2003. Т.29. №5. С. 499-504.
  6. Кудрявцева Н. Н. Секреция протеолитических ферментов тремя фитопатогенными микроорганизмами / Н. Н. Кудрявцева, А. В. Софьин, Т. А. Ревина, Е. Л. Гвоздева, Е. В. Иевлева, Т. А. Валуева // Прикладная биохимия и микробиология. 2013. Т.49. №5. С. 513-521.
  7. Валуева Т. А. Ингибиторы химотрипсина в клубнях картофеля, инфицированных возбудителем фитофтороза / Т. А. Валуева, Г. В. Кладницкая, Л. И. Ильинская, Н. Г. Герасимова, О. Л. Озерецковская, В. В. Мосолов // Биоорганическая химия. 1998. Т. 24. №5. С. 346-349.
  8. Валуева Т. А. Роль ингибиторов протеолитических ферментов в защите растений / Т. А. Валуева, В. В. Мосолов // Успехи биологической химии. 2002. Т. 42. С. 193-216.

Extraction and characterization of proteases from Phytophtora infestans

Authors


Maksutova V. O.*
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Tsvetkov V. O.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Shpirnaya I. A.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia
Ibragimov R. I.
Bashkir State University
32 Zaki Validi Street, 450076 Ufa, Republic of Bashkortostan, Russia

Abstract


In the course of the work, a total protease preparation purified from an extract of homogenate of mycelium of Phytophthora infestans with a high degree of purification was obtained using a specific substrate. The presence of high proteolytic activity in a variety of fractions was shown. Also, experiments were conducted to determine the temperature stability of proteases. The method of electrophoresis in an immobilized substrate showed the proteolytic activity of individual molecular forms of proteases in cells and P. infestans culture fluid.

Keywords


  • Phytophthora infestans
  • affine chromatography
  • proteolytic enzymes